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Sephadex凝膠色譜柱使用及再生

更新時間:2022-03-03      點擊次數(shù):3729

你知道凝膠色譜柱如何使用還有保存嗎?如果在使用過程中不清楚這些操作的話,可能會導致你的色譜柱損毀的哦!

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 色譜柱介紹

凝膠色譜柱是頭孢系列藥物聚合物專用色譜柱,它采用符合中國藥典2020版中頭孢類藥物聚合物的測試條件設計制作,進口葡聚糖凝膠Sephadex G-10裝填,適用于藥典中規(guī)定的多種抗生素聚合物的分析。

 凝膠色譜柱的使用

1. 為避免管路中的氣泡和有機溶劑被帶入凝膠柱中,開啟色譜泵,要用蒸餾水清洗整個色譜系統(tǒng),然后再接凝膠色譜柱。

重點切記:不要讓有機溶劑進入柱中。這樣會讓柱子中的凝膠脫水,會導致柱床損毀。

 

2. 使用過程不要使流速驟然加大,以防止壓力迅猛升高而導致柱床損毀,使柱效迅速降低。

凝膠色譜柱的保存

使用完凝膠柱之后,務*蒸餾水將鹽流動相從色譜柱中替換掉之后,再將含有抑菌劑的蒸餾水充入凝膠柱中,然后再將凝膠柱兩端封閉后,儲存在5℃的冰箱中。

如果第二天還要使用,也務必從系統(tǒng)中取下凝膠柱,將凝膠柱兩端封閉后放置。 

凝膠色譜柱的再生

由于高分子雜質含量較低,一般含量方法中均采用高難度大體積進行來提高檢測能力,多次進樣后,樣品可能在色譜柱中發(fā)生嚴重的非特異性吸附,可能改變凝膠色譜柱的分離機制,另一方面有可能造成色譜柱的堵塞,使得柱壓升高。所以要對凝膠進行恢復處理,方法可以使用:0.5mol/L NaOH和0.5mol/L NaCl的混合溶液30-60倍柱體積沖洗凝膠柱,再用蒸餾水沖洗至中性。

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