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PuroSpher STAR 色譜柱的使用步驟分為以下四步

更新時(shí)間:2022-08-22      點(diǎn)擊次數(shù):1012
  PuroSpher STAR 色譜柱的技術(shù)主要包括填料技術(shù)和裝柱技術(shù),填料的好壞對(duì)色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。裝柱技術(shù)沒(méi)有想象中那么簡(jiǎn)單,不同固定相、不同粒徑、不同柱管內(nèi)徑和長(zhǎng)度,裝柱工藝都有所不同,要裝出緊密、穩(wěn)定、均一的柱床,需要經(jīng)驗(yàn)積累。
  一般情況下,正相反相柱應(yīng)該都能反沖,只有兩端篩板孔徑不對(duì)稱(chēng)的柱子不能反沖,不過(guò)目前這樣的柱子已經(jīng)比較少見(jiàn)了。反沖是為了把柱頭的污染物沖洗掉,反沖后還是正著用比較好,以免柱子的兩頭都被污染。建議正向使用,反向沖洗。
  PuroSpher STAR 色譜柱的使用步驟分為以下四步:
  步驟一:預(yù)處理PuroSpher STAR 色譜柱.
  在萃取樣品之前,為了濕潤(rùn)PuroSpher STAR 色譜柱填料,用一滿(mǎn)管溶劑沖洗管子。反相類(lèi)型硅膠和非極性吸附劑介質(zhì),通常用水溶性有機(jī)溶
  劑如甲醇預(yù)處理,然后用水或緩沖溶液。甲醇濕潤(rùn)吸附劑表面和滲透鍵合烷基相,以允許水更有效地濕潤(rùn)硅膠表面。有時(shí)前預(yù)處理溶劑
  使用在甲醇之前。這些溶劑通常是與洗脫溶劑一樣,是用之消除固相萃取管上的雜質(zhì)及其對(duì)分析物的干擾,也可能該雜質(zhì)只溶于強(qiáng)洗脫溶劑。
  正相類(lèi)型固相萃取硅膠和極性吸附劑介質(zhì),通常用樣品所在的有機(jī)溶劑來(lái)預(yù)處理。離子交換填料將用于非極性有機(jī)溶劑中的樣品,其用3-5ml的去離子水或低濃度的離子緩沖溶液來(lái)預(yù)處理。為了使固相萃取填料從預(yù)處理到樣品加入時(shí)都保持濕潤(rùn),允許大約1毫升的預(yù)處理溶劑在管過(guò)濾片(frit)或萃取片表面之上。如果樣品是從一個(gè)貯液管或過(guò)濾管引入固相萃取管,則多加入0.5毫升后的預(yù)處理溶劑到1毫升的固相萃取管中,如果是2毫升到3毫升的PuroSpher STAR 色譜柱中,多加入4升到6毫升管中等等。這是為了保證在樣品加入之前PuroSpher STAR 色譜柱濕潤(rùn)。如果在樣品加入之前,PuroSpher STAR 色譜柱中的填料干了,重復(fù)預(yù)處理過(guò)程。在重新引入有機(jī)溶劑之前,用水沖洗柱中緩沖溶液的鹽。
  步驟二:加入樣品.
  將樣品裝入PuroSpher STAR 色譜柱,此時(shí),固相萃取小柱中的填料會(huì)吸附樣品中所感興趣的化合物或者樣品中的雜質(zhì)。這樣,當(dāng)樣品流出時(shí),所選擇的化合物(包括雜質(zhì))被留在PuroSpher STAR 色譜柱上。
  步驟三:沖洗填料.
  用一種強(qiáng)得能洗脫雜質(zhì)而又弱得能保留感興趣的化合物的沖洗液來(lái)沖洗雜質(zhì)。
  步驟四:洗脫感興趣的化合物。
  用溶劑將被吸附在PuroSpher STAR 色譜柱上的化合物洗脫在溶液里。

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